科普小課堂| 改良天狼星紅：染色那些事兒，一篇講明白！

改良天狼星紅染色的反應(yīng)原理是什么？

天狼星紅是一種強(qiáng)酸性染料，能與膠原纖維中的堿性基團(tuán)（如賴氨酸、羥脯氨酸）結(jié)合，在偏振光顯微鏡下呈現(xiàn)雙折光現(xiàn)象，用于區(qū)分不同類型的膠原纖維（如Ⅰ型呈橙紅色，Ⅲ型呈綠色）。

小鼠皮膚-偏振光結(jié)果

G1472-改良天狼星紅染色試劑盒的試劑組成和各試劑作用？

改良天狼星紅染色與其Masson三色染色的區(qū)別是什么？

改良天狼星紅染色適用于什么樣本?

本產(chǎn)品僅適用于組織樣本的石蠟切片、冰凍切片染色，不適用于細(xì)胞樣本（如培養(yǎng)細(xì)胞或細(xì)胞爬片等）染色。

改良天狼星紅染色是否對(duì)固定液、包埋方式有特殊要求？

一般無特殊要求，固定液一般常用4%多聚甲醛或10%福爾馬林；也可以使用Bouin’s、Zenker固定液，但含汞固定需充分脫汞。石蠟與冰凍切片均可；不推薦使用塑料包埋（甲基丙烯酸酯）會(huì)顯著降低染料滲透。

染色的切片厚度一般建議多少？

石蠟切片建議3-5μm（一般采用3μm），心肌或瘢痕組織建議6μm；冰凍切片建議8-12μm（如果易脫片，可以降低厚度至7-8μm）。

改良天狼星紅染色后背景偏紅是為什么？如何改善這種情況？

改良天狼星紅染色后，膠原纖維著色較淺或不明顯，是什么原因？如何進(jìn)行調(diào)整？

未進(jìn)行Weigert鐵蘇木素染色，天狼星紅染色后細(xì)胞核著紅色是正常的嗎？

這個(gè)為正?，F(xiàn)象，G1472采用新型無毒的黃色染料替代K味酸，在能用于正常鑒別膠原纖維和肌纖維的同時(shí)，可能會(huì)額外引入部分細(xì)胞核淺著色（不影響結(jié)果判斷），這個(gè)可以通過前面進(jìn)行Weigert鐵蘇木素染色來避免。

鐵蘇木素染色是必須的嗎？可以用常規(guī)蘇木素替代嗎？

如無細(xì)胞核染色需求，可不進(jìn)行鐵蘇木素染色，直接進(jìn)行天狼星紅染色；不建議使用常規(guī)蘇木素（如Mayer蘇木素）替代，因?yàn)殍F蘇木素為抗酸型蘇木素，能一定程度耐受天狼星紅染色（酸性溶液），有效減少細(xì)胞核脫色。

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